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智立中特 |
中文名:产芽孢梭菌(生孢梭菌)
拉丁属名:Clostridiumsporogenes
规格:冻干粉
用途:无菌检查、微生物限度检查用菌株
保存条件:常温
批号:64941-2A6-1
生物安全等级:1
性状:乳白或白色、冻干粉
包装:菌种管
产芽孢梭菌的菌种培养
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
三、产芽孢梭菌的使用方法和要求
1.培养基:胰酶消化碎肉半流体培养基(培养基121)或适宜培养基。
2.培养条件:35~37℃,厌氧。
3.启开方法:
1)复苏菌种前应准备各适于该菌种生长的固体、液体培养基和培养设备,所有操作均应在合适的生物安全防护条件下进行;
2)启开菌种宜采用据开法(据开前用75%酒精棉消毒菌种管外壁)。用吸管将液体培养基0.5ml左右注入被启开的菌种安瓿中并吹打,使安瓿中冻干菌种溶解成菌悬液;
3)将上述菌悬液全部吸出,分别接种到固体斜面和液体培养基中,于35~37℃厌氧条件下培养18~24小时;
4)次日观察菌种的生长情况,如菌种未生长,应继续培养至72小时;
5)复苏后的菌种按规定使用。
四、储藏条件:暂不启开的安瓿可置于2~8℃保藏。
五、注意事项
1.该菌种用于实验室检验及研究用,不能用于商业用途。
2.初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养,如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失,单位不负责任。
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